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6 de mayo de 2021
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Artículo
Sí

Validation of a Gas Chromatography-Mass Spectrometry Method for the Measurement of the Redox State Metabolic Ratios Lactate/Pyruvate and β-Hydroxybutyrate/Acetoacetate in Biological Samples

Publicado en: International Journal Of Molecular Sciences. 22 (9): 4752- - 2021-05-01 22(9), DOI: 10.3390/ijms22094752

Autores: Wijngaard, Robin; Perramon, Meritxell; Parra-Robert, Marina; Hidalgo, Susana; Butrico, Gina; Morales-Ruiz, Manuel; Zeng, Muling; Casals, Eudald; Jimenez, Wladimiro; Fernandez-Varo, Guillermo; Shulman, Gerald I; Cline, Gary W; Casals, Gregori

Afiliaciones

‎ Hosp Clin Univ, Ctr Invest Biomed Red Enfermedades Hepat & Digest, Inst Invest Biomed August Pi i Sunyer IDIBAPS, Serv Biochem & Mol Genet, Carrer Villarroel 170, Barcelona 08036, Spain - Autor o Coautor
‎ Univ Barcelona, Dept Biomed, Barcelona 08036, Spain - Autor o Coautor
‎ Working Grp Biochem Assessment Hepat Dis SEQCML, Barcelona 08036, Spain - Autor o Coautor
‎ Wuyi Univ, Sch Biotechnol & Hlth Sci, 99 Yingbing Middle Rd, Jiangmen 529020, Peoples R China - Autor o Coautor
‎ Yale Sch Med, Dept Internal Med, New Haven, CT 06510 USA - Autor o Coautor
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Resumen

The metabolic ratios lactate/pyruvate and beta-hydroxybutyrate/acetoacetate are considered valuable tools to evaluate the in vivo redox cellular state by estimating the free NAD+/NADH in cytoplasm and mitochondria, respectively. The aim of the current study was to validate a gas-chromatography mass spectrometry method for simultaneous determination of the four metabolites in plasma and liver tissue. The procedure included an o-phenylenediamine microwave-assisted derivatization, followed by liquid-liquid extraction with ethyl acetate and silylation with bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide:trimethylchlorosilane 99:1. The calibration curves presented acceptable linearity, with a limit of quantification of 0.001 mM for pyruvate, beta-hydroxybutyrate and acetoacetate and of 0.01 mM for lactate. The intra-day and inter-day accuracy and precision were within the European Medicines Agency's Guideline specifications. No significant differences were observed in the slope coefficient of three-point standard metabolite-spiked curves in plasma or liver and water, and acceptable recoveries were obtained in the metabolite-spiked samples. Applicability of the method was tested in precision-cut liver rat slices and also in HepG2 cells incubated under different experimental conditions challenging the redox state. In conclusion, the validated method presented good sensitivity, specificity and reproducibility in the quantification of lactate/pyruvate and beta-hydroxybutyrate/acetate metabolites and may be useful in the evaluation of in vivo redox states.

Palabras clave

acetoacetatebloodgc-msketone bodieslactatemicrowave-assisted derivatizationnicotinamide adenine dinucleotidepitfallspyruvateAcetoacetateBloodGc-msKeto-acidsKetone bodiesLactateMicrowave-assisted derivatizationNicotinamide adenine dinucleotidePitfallsPyruvateRedox state

Indicios de calidad

Impacto bibliométrico. Análisis de la aportación y canal de difusión

El trabajo ha sido publicado en la revista International Journal Of Molecular Sciences debido a la progresión y el buen impacto que ha alcanzado en los últimos años, según la agencia WoS (JCR), se ha convertido en una referencia en su campo. En el año de publicación del trabajo, 2021, se encontraba en la posición 69/297, consiguiendo con ello situarse como revista Q1 (Primer Cuartil), en la categoría Biochemistry & Molecular Biology.

Independientemente del impacto esperado determinado por el canal de difusión, es importante destacar el impacto real observado de la propia aportación.

Según las diferentes agencias de indexación, el número de citas acumuladas por esta publicación hasta la fecha 2025-12-08:

  • WoS: 9
  • Scopus: 9
  • Europe PMC: 2

Impacto y visibilidad social

Desde la dimensión de Influencia o adopción social, y tomando como base las métricas asociadas a las menciones e interacciones proporcionadas por agencias especializadas en el cálculo de las denominadas “Métricas Alternativas o Sociales”, podemos destacar a fecha 2025-12-08:

  • El uso, desde el ámbito académico evidenciado por el indicador de la agencia Altmetric referido como agregaciones realizadas por el gestor bibliográfico personal Mendeley, nos da un total de: 23.
  • La utilización de esta aportación en marcadores, bifurcaciones de código, añadidos a listas de favoritos para una lectura recurrente, así como visualizaciones generales, indica que alguien está usando la publicación como base de su trabajo actual. Esto puede ser un indicador destacado de futuras citas más formales y académicas. Tal afirmación es avalada por el resultado del indicador “Capture” que arroja un total de: 23 (PlumX).

Con una intencionalidad más de divulgación y orientada a audiencias más generales podemos observar otras puntuaciones más globales como:

    Es fundamental presentar evidencias que respalden la plena alineación con los principios y directrices institucionales en torno a la Ciencia Abierta y la Conservación y Difusión del Patrimonio Intelectual. Un claro ejemplo de ello es:

    • El trabajo se ha enviado a una revista cuya política editorial permite la publicación en abierto Open Access.

    Análisis de liderazgo de los autores institucionales

    Este trabajo se ha realizado con colaboración internacional, concretamente con investigadores de: China; United States of America.

    Existe un liderazgo significativo ya que algunos de los autores pertenecientes a la institución aparecen como primer o último firmante, se puede apreciar en el detalle: Primer Autor (Wijngaard R) y Último Autor (Casals Mercadal, Gregori).

    los autores responsables de establecer las labores de correspondencia han sido Fernandez Varo, Guillermo y Casals Mercadal, Gregori.

    Reconocimientos ligados al ítem

    This study has been funded by Instituto de Salud Carlos III through the project PI19/00774 to G.C. and G.F-V, and Direccion General de Investigacion Cientifica y Tecnica RTI2018-094734-B-C2 to W.J, co-funded by European Regional Development Fund, European Union, A way to make Europe; National Natural Science Foundation of China (31950410536 to E.C.), the Wuyi University Funding (2018TP010 to E.C.), Guangdong Science and Technology Department (2019A050512006 to E.C.).